用途
仅供科研使用，定量检测血清、血浆、细胞培养上清液中前列腺素 E2（PGE2）的浓度。
检验原理
本试剂盒采用竞争法酶联免疫吸附试验（ELISA）。在预包被抗前列腺素 E2（PGE2）抗体 （固相抗体）的微孔酶标板中，加入人 前列腺素 E2（PGE2）校准品和待测样本，再加入 HRP 标记的人 前列腺素 E2（PGE2）抗原（酶标抗原），经过温育与充分洗涤，去除未结合的组分， 在微孔板固相表面形成固相抗体-酶标抗原的免疫复合物。加底物 A 和 B，底物在 HRP 催化下， 产生蓝色产物，在终止液（2M 硫酸）作用下，最终转化为黄色，在酶标仪 450nm 波长上测定 吸光度（OD 值），吸光度（OD 值）与待测样品中人 前列腺素 E2（PGE2）的浓度负相关。拟 合校准品曲线，可以计算出样本中人 前列腺素 E2（PGE2）的浓度。
实验所需自备物品
1、酶标仪 2、精密移液器及一次性吸头 3、蒸馏水 4、洗瓶或者自动洗板机 5、37℃水浴锅或恒温箱 6、500ml 量筒 7、无粉一次性乳胶手套
操作步骤
1. 按前面说明书描述的方法，配制好试剂盒各种组分的工作液。 2. 从铝箔袋中取出所需板条，剩余的板条用自封袋密封放回冰箱。设置标准品孔、空白孔和 样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品 50μL，空白孔不加，样本孔加待测样本 50μL。 3. 除空白孔外，标准品孔和样本孔，加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗原 100μL。 4. 用封板膜盖住反应板，37℃水浴锅或恒温箱温育 60min。 5. 揭开封板膜，弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置 20S，甩去洗涤液，吸水 纸上拍干，如此重复 5 次。若使用自动洗板机，请按洗板机操作程序进行洗板，添加浸泡 30s 的程序，可以提高检测的精度。洗板结束，加底物前，要在干净不掉屑的纸上，充分 拍干反应板。 6. 将底物 A 和 B 按 1:1 体积充分混合，所有孔中加入底物混合液 100μL。用封板膜盖住反 应板，37℃水浴锅或恒温箱温育 15min。 7. 所有孔加入终止液 50μL，在 450 波长的酶标仪上读取各孔吸光度（OD 值）。 【实验结果计算】 检测完成后，以标准品浓度做为纵坐标，对应的吸光度（OD 值）作为横坐标，利用计算 机软件，采用四参数 Logistic 曲线拟合（4-pl），创建标准曲线方程，通过样本的吸光度（OD 值），利用方程计算样品的浓度值。 如果样品被稀释，通过上述方法测的的浓度值，要乘以稀释倍数，才是样品的最终浓度
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