检测范围
2 nmol/L– 32 nmol/L。
用途
用于检测血清、血浆、细胞培养上清液和组织等样本中人环磷酸腺苷(cAMP)的浓度
精密度
批内变异系数 CV%小于 10%;批间变异系数 CV%小于 15%。
实验所需自备物品
1)能够检测 450 nm 吸光度的酶标仪 2)移液器及枪头、加样槽 3)37℃恒温箱或水浴锅 4)准备试剂用的试管、离心管、量筒等 5)蒸馏水或去离子水 6)涡旋振荡器、微孔板振荡器
操作步骤
所有试剂和组分都先恢复到室温,标准品、质控品和样品,建议做复孔。 1、按前面说明书描述的方法,配制好试剂盒各种组分的工作液。 2、从铝箔袋中取出所需板条,剩余的板条用自封袋密封放回冰箱。 3、将预包被板从密封袋中取出,设一个空白对照孔,不加任何液体;每个校准品设 2 孔,每孔 加入对应校准品 50μl;其余每个检测孔直接加待测血清或质控品 50μl。 4、除空白孔外所有孔加入生物素化抗原 50μl,混匀,贴上封板膜,置 37℃温育 60 分钟。 5、手工洗板:弃去孔内液体,洗涤液注满各孔,静置 10 秒甩干,重复 3 次后拍干。洗板机洗 板:选择洗涤 3 次程序洗板后拍干。 (提示:为获得理想的实验结果,必须彻底移除残留液体。洗板完成之后,请立即进行下步操 作,不要让微孔板干燥。) 6、每孔加入酶标亲和素 50μl(空白对照孔除外),混匀,贴上封板膜,置 37℃温育 30 分钟。 7、手工洗板:弃去孔内液体,洗涤液注满各孔,静置 10 秒甩干,重复 3 次后拍干。洗板机洗 板:选择洗涤 3 次程序洗板后拍干。 8、每孔加显色剂 A 50μl,显色剂 B 50μl,振荡混匀后,置 37℃避光显色 15 分钟,每孔加终 止液 50μl。 9、用酶标仪读数,取波长 450nm,先用空白对照孔调零点,然后测定各孔光密度值(OD 值)。