检测范围
62.5 pg/mL– 1000 pg/mL。
用途
用于检测血清、血浆、细胞培养上清液和组织等样本中大鼠血管紧张素 II(Ang-II)的浓度。
检验原理
试剂盒采用酶联免疫分析方法。采用生物素标记 Ang-II，纯化的抗 Ang-II 抗体包被微孔板， 在竞争抑制反应中，一定量的固相抗体与生物素标记 Ang-II 及非标记抗原（校准品或标本）进 行抑制竞争反应，抗体与生物素标记的 Ang-II 结合量受非标记抗原量所抑制，非标记抗原量多, 抗体与生物素标记的 Ang-II 结合就少，反之结合就多；反应平衡后，形成固相抗体-生物素化 Ang-II，再加入酶标记的亲和素，形成固相抗体-生物素化 Ang-II-酶标-亲合素复合物。经加底 物显色后，用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（OD 值）。随着 Ang-II 浓度的升高，OD 值逐渐下降呈良好的线性关系。本试剂盒具有灵敏度高、特异性强、重复性好、操作简单、快 速等特点，对血清中 Ang-II 的减少或升高有可靠的检出性能。
精密度
批内变异系数 CV%小于 10%；批间变异系数 CV%小于 15%。
实验所需自备物品
1）能够检测 450 nm 吸光度的酶标仪 2）移液器及枪头、加样槽 3）3.37℃恒温箱或水浴锅 4）准备试剂用的试管、离心管、量筒等 5）蒸馏水或去离子水 6）涡旋振荡器、微孔板振荡器
操作步骤
所有试剂和组分都先恢复到室温，标准品、质控品和样品，建议做复孔。 1、按前面说明书描述的方法，配制好试剂盒各种组分的工作液。 2、从铝箔袋中取出所需板条，剩余的板条用自封袋密封放回冰箱。 3、将预包被板从密封袋中取出，设一个空白对照孔，不加任何液体；每个校准品设 2 孔，每孔 加入对应校准品 50μl；其余每个检测孔直接加待测血清或质控品 50μl。 4、除空白孔外所有孔加入生物素化抗原 50μl，混匀，贴上封板膜，置 37℃温育 60 分钟。 5、手工洗板：弃去孔内液体，洗涤液注满各孔，静置 10 秒甩干，重复 3 次后拍干。洗板机洗 板：选择洗涤 3 次程序洗板后拍干。 （提示：为获得理想的实验结果，必须彻底移除残留液体。洗板完成之后，请立即进行下步操 作，不要让微孔板干燥。） 6、每孔加入酶标亲和素 50μl（空白对照孔除外），混匀，贴上封板膜，置 37℃温育 30 分钟。 7、手工洗板：弃去孔内液体，洗涤液注满各孔，静置 10 秒甩干，重复 3 次后拍干。洗板机洗 板：选择洗涤 3 次程序洗板后拍干。 8、每孔加显色剂 A 50μl，显色剂 B 50μl，振荡混匀后，置 37℃避光显色 15 分钟，每孔加终 止液 50μl。 9、用酶标仪读数，取波长 450nm，先用空白对照孔调零点，然后测定各孔光密度值（OD 值）。
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