检测范围
0.25 ng/mL – 8 ng/mL。
用途
用于检测血清、血浆、细胞培养上清液等样本中雷珠单抗(Lucentis)的浓度
精密度
批内变异系数 CV%小于 10%;批间变异系数 CV%小于 15%。
实验所需自备物品
试验所需自备试验器材 (不提供,但可协助购买) 1.标准规格酶标仪。2.自动洗板机。 3.振荡器。 4.系列可调节移液器及吸头,一次检测样品较多时,最好用多通道移液器。
操作步骤
推荐样本稀释方案:建议老师先做预实验摸索样本最佳稀释倍数,然后再做正式实验。 1、所有试剂和组分都先恢复到室温,标准品、质控品和样品,建议做复孔。 2、按前面试剂准备中描述的方法,配制好试剂盒各种组分的工作液。 3、从铝箔袋中取出所需板条,剩余的板条用自封袋密封放回冰箱。 4、设置标准品孔、样本孔和空白孔,标准品孔各加不同浓度的标准品 50μL,样本孔加待测样 本 50μL,空白孔不加,用封板膜盖住反应板,37℃水浴锅或恒温箱温育 30min。 5、揭开封板膜,弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置 20s,甩去洗涤液,吸水纸 上拍干。如此重复 4 次(共洗板 5 次)。若使用自动洗板机,请按洗板机操作程序进行洗板, 添加浸泡 20s 的程序,可以提高检测的精度。洗板结束,加底物前,要在干净不掉屑的纸上, 充分拍干反应板。 6、除空白孔外,标准品孔和样本孔,加入辣根过氧化物酶标记的检测抗体 100μL。 7、用封板膜盖住反应板,37℃水浴锅或恒温箱温育 30min。 8、揭开封板膜,弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置 20s,甩去洗涤液,吸水纸 上拍干。如此重复 4 次(共洗板 5 次)。若使用自动洗板机,请按洗板机操作程序进行洗板, 添加浸泡 20s 的程序,可以提高检测的精度。洗板结束,加底物前,要在干净不掉屑的纸上, 充分拍干反应板。 9、将底物 A 和 B 按 1:1 体积充分混合,所有孔中加入底物混合液 100μL。用封板膜盖住反应 板,37℃水浴锅或恒温箱温育 15min。 10、所有孔加入终止液 50μL,在酶标仪 450nm 波长下读取各孔吸光度(OD 值)。